Die ehemalige Auftragskillerin Beatrix Kiddo sinnt auf Rache: Ihr einstiger Freund Bill, den sie verlassen hat um ein neues Leben fernab eines kriminellen Umfelds zu beginnen, hat ein Massaker auf ihrer Hochzeit verübt. Bei diesem wird ihr Verlobter und die Hochzeitsgesellschaft brutal ermordet und die schwangere Beatrix so schwer Verletzt, dass sie für vier Jahre im Koma lag. Ab dem Zeitpunkt ihrer Genesung gibt es für Beatrix nur ein Ziel: Ihre Todesliste zu vollenden und sich an jedem Beteiligten zu rächen. Zwei Kandidaten ihrer Liste hat sie bereits ausgelöscht. Doch bevor Beatrix zum finalen Schlag ausholt und Bill tötet, sollen zwei andere ehemalige Freunde ihr Leben lassen. Zunächst stattet sie Budd, Bills Bruder, einen Besuch ab. Dieser lebt verwahrlost in einem Wohnwagen, wurde jedoch von Bill vor der Gefahr gewarnt. So gelingt es ihm, Beatrix bei ihrer Ankunft außer Gefecht zu setzen. Er bietet Elle Driver, die als nächstes auf der Todesliste steht, an, Kiddo für 1 Million Dollar zu ermorden. Diese stimmt direkt zu. Budd betäubt Beatrix und begräbt sie bei lebendigem Leib auf einem Friedhof. Um aus der Situation, die einem sicheren Todesurteil gleichkommt, zu entkommen, erinnert sich die ehemalige Killerin an die Worte ihres Ausbilders Meister Pai Mei. Und tatsächlich gelingt es Beatrix sich aus der misslichen Lage zu befreien. Um ihren Plan fortzuführen, macht sie sich auf den Weg zurück zum Wohnwagen. Dort beobachtet sie, wie die einäugige Elle Driver vorgibt, Budd das versprochene Geld zu übergeben, ihn aber hinterrücks mit Hilfe der Schwarzen Mamba ermordet. Es kommt zu einem Kampf zwischen den beiden Frauen, in dessen Verlauf es Beatrix gelingt, ihrer Gegnerin auch noch das zweite Auge herauszureißen. Kiddo entfernt sich vom Schauplatz und überlässt die blinde Elle Driver der Schwarzen Mamba. Um den Plan zu vollenden, macht sich Beatrix Kiddo auf die Suche nach Bill und findet ihn zusammen mit der gemeinsamen vierjährigen Tochter. Es kommt zum finalen Kampf, bei dem Beatrix eine unschlagbare Technik anwendet, die ihr Meister Pai Mei gelehrt hat...